目前,上一般按紫外可見分光光度計(jì)的儀器結(jié)構(gòu)將其分為
單光束、雙光束、準(zhǔn)雙光束和雙波長四類。
一、單光束紫外可見分光光度計(jì)
單光束紫外可見分光光度計(jì)只有一束單色光,一只比色皿,一只光電轉(zhuǎn)換器（又稱光接收器）。其光電轉(zhuǎn)換器通常采用硅光電池、光敏三極管或光電管,其結(jié)構(gòu)簡單、價(jià)格便宜,但因其雜散光、光源波動(dòng)、電子學(xué)的噪聲等都不能抵消,故單光束紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度差。單光束紫外可見分光光度計(jì),由于其技術(shù)指標(biāo)比較差,特別是雜散光、光度噪聲、光譜帶寬等主要技術(shù)指標(biāo)比較差,因此,分析誤差也較大。所以,它們在使用上受到限制。一般來講,要求較高的制藥行業(yè)、質(zhì)量檢驗(yàn)行業(yè)、科研等行業(yè)不適宜使用單光束紫外可見分光光度計(jì)。
二、雙光束紫外可見分光光度計(jì)
雙光束紫外可見分光光度計(jì)就是有兩束單色光的紫外可見分光光度計(jì)。它有兩種類型:一種是兩束單色光,兩只比色皿,兩只光電轉(zhuǎn)換器;另一種是兩束單色光,兩只比色皿,一只光電轉(zhuǎn)換器。目前,國內(nèi)外的雙光束紫外可見分光光度計(jì)中,兩只光電轉(zhuǎn)換器的雙光束紫外可見分光光度計(jì)儀器已很少見,絕大多數(shù)或基本上都是一只光電轉(zhuǎn)換器的儀器,特別是雙光束紫外可見分光光度計(jì),都是一只光電轉(zhuǎn)換器的儀器。這兩種類型的雙光束紫外可見分光光度計(jì),所用的光電轉(zhuǎn)換器基本上全部是光電倍增管（PMT）。
（一）兩只光電轉(zhuǎn)換器的雙光束紫外可見分光光度計(jì)
使用兩只光電倍增管的雙光束紫外可見分光光度計(jì),光源波動(dòng)、雜散光、電噪聲的影響都能部分抵消,所以定點(diǎn)測量時(shí),光度準(zhǔn)確度好,但結(jié)構(gòu)較復(fù)雜、價(jià)格較貴。同時(shí),因光電倍增管的光譜響應(yīng)特性不可能*配對,所以,光譜掃描時(shí)測量誤差很大,一般不用這種雙光束紫外可見分光光度計(jì)來掃描。此外,因一束光分成兩束,所以每束光的能量低,信噪比不如單光束紫外可見分光光度計(jì)好。目前,我國市場上的TY-1880、TY-8500、UV/FL-1型等儀器屬于此類雙光束紫外可見分光光度計(jì)。
（二）一只光電轉(zhuǎn)換器的雙光束紫外可見分光光度計(jì)
目前,上的雙光束紫外可見分光光度計(jì)都是兩束光、兩只比色皿,一只光電轉(zhuǎn)換器的儀器。如美國的Lambda900、Lambda9、Cary6000、Cary500、Cary5型和日本的UV-2450、UV-3101、U-3400型以及我國的TU-1901、TU-1900、UV-2100、UV-763型雙光束紫外可見分光光度計(jì)等都是如此。這類雙光束紫外可見分光光度計(jì)的技術(shù)指標(biāo)大多都很先進(jìn)。由于有兩束光,所以對光源波動(dòng)、雜散光、電子學(xué)噪聲等的影響都能部分抵消,所以其雜散光、光度噪聲都很小。因此,這種類型的雙光束紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度好。這是一只光電轉(zhuǎn)換器的雙光束紫外可見分光光度計(jì)的zui大優(yōu)點(diǎn)。因一束單色光被分成兩束,所以每束光的能量降低了一半。因此,一只光電轉(zhuǎn)換器的雙光束紫外可見分光光度計(jì)的信噪比不如單光束紫外可見分光光度計(jì)大。但因兩束光路對噪聲可相互抵消,所以其靈敏度仍然很好。
三、準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì)
所謂準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì),就是有兩束光,但只有一只比色皿的紫外可見分光光度計(jì)。其中,一束光通過比色皿,另一束光不通過比色皿。不通過比色皿的那束光,主要起抵消光源波動(dòng)對分析誤差影響的作用。準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì)有兩種類型:一種是兩束單色光,一只比色皿,兩只光電轉(zhuǎn)換器;另一種是一束單色光,一束復(fù)合光,一只比色皿,兩只光電轉(zhuǎn)換器。
（一）兩束單色光
這種準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì)比較多見。目前國內(nèi)外市場上或用戶正在使用的準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì),基本上都是這種類型的儀器。這種準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì),一般都用硅光電池或光電管作光電轉(zhuǎn)換器。不通過比色皿的這一束光,除作為參考光束外,還有一個(gè)很重要的作用,就是用來抵消光源波動(dòng),以提高儀器的穩(wěn)定性。這種儀器的結(jié)構(gòu)也較簡單,價(jià)格較便宜。
我國企業(yè)目前正在生產(chǎn)的TU-1800、TU-1800S、TU-1800PC、TU-1800SPC、UV-762、UV-1600等紫外可見分光光度計(jì),就是兩束單色光,一只比色皿,兩只光電轉(zhuǎn)換器的準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì)。因其有兩束光,所以光源波動(dòng)可抵消一部分,電子學(xué)噪聲也可部分抵消（因只有一個(gè)比色皿,雜散光不能抵消）,故準(zhǔn)確度較單光束儀器好。它屬普及型的常規(guī)儀器。
（二）一束單色光,一束復(fù)合光
這種結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì),不通過比色皿的那束參考光束為復(fù)合光,它不經(jīng)過分光器,直接進(jìn)入光電轉(zhuǎn)換器。所以,參考光束的能量比較大（要比樣品光束強(qiáng)得多）,經(jīng)過光電轉(zhuǎn)換器后,電信號也比較強(qiáng)。因?yàn)閮墒獾膹?qiáng)度相差太多,復(fù)合光的強(qiáng)度過大,單色光的強(qiáng)度較小,很難達(dá)到抵消光源波動(dòng)對分析誤差影響的作用,甚至加大這種影響。目前,一束單色光和一束復(fù)合光的準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì)已很少見。
四、雙波長紫外可見分光光度計(jì) 雙波長紫外可見分光光度計(jì)都采用兩個(gè)單色器。光源發(fā)出的光被兩個(gè)單色器分別分離出波長為λ1和λ2,通過斬波器將兩束單色光λ1和λ2交替入射到同一試樣中,光電倍增管交替地接收到經(jīng)過試樣吸收后的這兩束單色光,并把它們變成電信號。
雙波長紫外可見分光光度計(jì)主要適用于求出試樣中待測組分的含量或濃度。如果試樣中有共存干擾吸收物質(zhì),則可采用等吸收點(diǎn)法和系數(shù)倍率法測量。如果試樣的吸收光譜上,有兩個(gè)或兩個(gè)以上組分的吸收峰互相重疊或非常接近,或者有很大的渾濁背景吸收干擾,則可利用導(dǎo)數(shù)光譜來分析測試。
